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Scheda del Corso: Metodologie microscopiche avanzate Dipartimento DAFNE - A.A 2016/2017 (CFU 6)

Programma

Programma del corso
Microscopia ottica: principi di funzionamento ed applicazioni. Le tecniche cito-istologiche come metodo diagnostico; tecniche di prelievo, fissazione, inclusione e colorazione di campioni. Metodi di indagine istochimica. Microscopia ottica a super-risoluzione: principi ed applicazioni. La microscopia ottica a microdissezione laser e sue applicazioni. La microiniezione: presentazione e discussione di casi studio.
Tecniche di immunoistochimica ed immunofluorescenza su cellule e tessuti; tecniche di preparazione dei campioni; possibili applicazioni in ambito biologico e in particolare nella ricerca biomedica di base ed applicata. Gli anticorpi e le immunolocalizzazioni. Fluorescenza e fluorocromi. Le proteine fluorescenti. Il microscopio a fluorescenza e il microscopio a scansione laser confocale; principi di preservazione dei campioni per la microscopia confocale. Procedure per l’ibridazione in situ su cellule e sezioni di tessuti; ibridazione di acidi nucleici: principi ed applicazioni. La microscopia elettronica: principi di funzionamento ed applicazioni. Il microscopio elettronico a trasmissione e a scansione: tecniche di preparazione dei campioni. L’immunogold labelling e sue applicazioni in ambito biomedico. Microanalisi elementare del campione: determinazione della presenza e dell'accumulo di sostanze tossiche all'interno di campioni biologici; presentazione e discussione di casi studio. Il microscopio elettronico a scansione ambientale principi ed applicazioni. Immunogold in microscopia elettronica a scansione ambientale: caratteristiche applicative. Metodi quantitativi di elaborazione dell’immagine. Discussione di lavori scientifici in lingua inglese riguardanti le tematiche e gli approcci metodologici affrontati durante il corso.
Descrizione sintetica delle attività di esercitazione
Allestimento di vetrini istologici: fissazione, inclusione, taglio al microtomo, colorazione di campioni ed osservazione al microscopio ottico. Reazioni di immunolocalizzazione: la reazione ABC immunoperossidasi intensificata con nickel. Preparazione di campioni per la microscopia a fluorescenza: osservazione di campioni al microscopio a fluorescenza e al microscopio a scansione laser confocale. Preparazione di campioni per la microscopia elettronica a trasmissione: fissazione, inclusione, taglio all’ultramicrotomo, contrasto positivo e negativo, ed osservazione al TEM dei campioni. Reazioni di immunolocalizzazione per la microscopia elettronica: preparazione ed osservazione di campioni. Il microscopio elettronico a scansione: preparazione di campioni ed osservazione. Microanalisi elementare del campione: preparazione ed osservazione di campioni in laboratorio. Le esercitazioni verranno svolte presso il laboratorio di zoologia e nei laboratori del CGA.

Testi consigliati

Dispense, diapositive delle lezioni e articoli scientifici in inglese forniti dal docente.

Propedeuticità

Frequenza

Facoltativa

Metodologia didattica

Ore lezione: 48

Valutazione del profitto

Prova orale

Descrizione dei metodi di accertamento

Esame orale, consistente in quesiti relativi ad aspetti teorici e pratici inerenti alle tematiche affrontate. Nella determinazione del voto finale si terrà conto di diversi aspetti: il livello di conoscenza degli argomenti trattati (sufficiente, medio, completo, approfondito); la capacità di collegare tra loro i concetti acquisiti (sufficiente, buona, ottima); la capacità di analisi e di senso critico (sufficiente, buona, ottima), la padronanza di espressione (esposizione carente, semplice, chiara e corretta, sicura e corretta).

Luogo lezioni

Ex Facoltà di Agraria
via San Camillo de Lellis snc
Viterbo

Orario lezioni

come da orario pubblicato sul sito

Comunicazioni

Martedì 11.00-13.00
Giovedì 11.00-13.00

Link a materiale didattico

non presente